猪链球菌的分离与鉴定
15# + - - + + + + + + -
判定标准:“+”表示大多数(90%—100%)菌株为阳性;“-”表示大多数(90%—100%)菌株为阴性。
表2表明分离的3#、8#、13#、15#菌的生化反应结果均符合猪链球菌的生化特性,说明分离的菌均为猪链球菌。
3.3 血清学鉴定结果
将3#、8#、13#、15#细菌悬液与1/2及2型抗血清混合,立即可见明显的凝集现象,但不与1型及其他型抗血清出现凝集。直接挑取细菌菌落与血清混匀,也能得到一致结果。阴性对照均未见凝集现象。
3.4 致病力试验结果及保护力试验结果
3.4.1致病力试验结果
第一组、第二组小白鼠注射血清肉汤培养物48h内均未见死亡,第三组48h内有一只死亡,第四组、第五组、第六组在注射血清肉汤培养物18h内全部死亡。死亡后,小白鼠皮肤发绀,剖检肝、脾、肺、心出血,呈败血症。第七组健活。由于第一、二、三组死亡数量非常少,所以,再用相同剂量分别背部皮下接种小白鼠各2只,48h后处死,剖检发现注射部位有直径0.9~1.1cm的脓肿,浓汁呈黄绿色。
3.4.2保护力试验结果 免疫的小白鼠再经攻毒后均未发病。
3.5细菌回收试验结果
将上述死亡及发病的小白鼠剖检采集病料,进行细菌分离、生化试验及血清学鉴定,能得到原分离菌。
3.6药敏试验结果(见表3)
表3 药敏试验结果
菌号
抑菌环直径(mm)
头孢菌素 青霉素 洁霉素 卡那霉素 土霉素 链霉素 庆大霉素
3# 19 15 14 13 8 7 7
8# 18 16 13 13 8 6 7
13# 19 16 14 13 7 7 8
15# 19 15 13 14 8 8 8
平均值 18.75 15.5 13.5 13.25 7.75 7.0 7.5
表3表明,结果敏感的药物依次是:头孢菌素、青霉素;中度敏感的依次是:洁霉素和卡那霉素;而对土霉素、链霉素、庆大霉素具有抗药性。
4.分析与讨论
4.1 猪链球菌(Streptoccus suts)是危害养猪业的一种重要病原菌。80年代初,加拿大由猪链球菌引起的疾病开始增加。那时仅检出9种夹膜血清型,其中2型是最常见的。
4.2 猪链球菌病在临床上有败血型、脑膜脑炎型、关节炎型支气管炎型等。过去屡有败血型猪链球菌的报道,而关于集约化养猪场关节炎型链球菌病的报道较少。本次试验从患关节炎猪的关节液中成功的分离出了猪链球菌。另外,岐山种猪场,约有60%的仔猪流行关节炎,严重者可发生败血症而死亡,给种猪场造成巨大的经济损失。所以,研究本病可为生产中防制本病提供理论依据。
4.3 病猪和带菌猪是本病的重要传染源。病猪的鼻液、尿液、肌肉、内脏和关节内均带有病原体,所以,我们建议,首先应加强对健康猪的免疫。另一方面,在发病后,加强病猪和健康猪的隔离,根据实验室所做的药敏试验结果,配合药物治疗,建议用头孢菌素、青霉素、洁霉素等药物治疗。岐山县种猪繁育场采纳我们的建议后,首先对所有的未发病仔猪用灭活疫苗免疫接种,对已发病的猪用青霉素等药物配合治疗。另外,注意卫生管理。目前该病已得到有效的控制。
4.4 从致病力试验结果可以看出,引起猪关节炎的猪链球菌的致病力较小,而引起败血症的猪链球菌的致病力较强。但通
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