当前乳腺癌诊治中的病理学新发展

　　四、乳腺癌骨髓微转移的检测

　　骨髓是乳腺癌转移的常见部位，而且常常是乳腺癌发生远处转移首先累及的器官。目前常规的骨髓细胞学检查往往不能发现早期病人骨髓中的微转移，骨扫描、骨骼的X线检查等对早期骨髓微转移的检测意义也不大。如何提高骨髓微转移的检出率具有重要意义。

　　1．应用免疫组织化学技术检测乳腺癌骨髓微转移：乳腺癌为上皮性肿瘤，而骨髓属间叶来源，本身无上皮性抗原的表达，故可应用针对上皮抗原如细胞角蛋白、上皮膜抗原（EMA）等单克隆抗体进行染色。Osborne等［10］以乳腺癌细胞系（MCF-7）按不同细胞浓度与正常骨髓细胞相混合，然后进行免疫组织化学染色，能检测出2×105骨髓细胞中的一个癌细胞。利用免疫组织化学技术检测乳腺癌微转移有一定的局限性，如某些正常骨髓细胞可能会出现不同程度的交叉反应，肿瘤细胞表面抗原表达的不均一性也可能影响对转移细胞的正确评判。故在实际应用中，目前用多种抗体组成所谓的“鸡尾酒方法”， 既可降低假阴性率，又可减少假阳性。

　　2．利用RT-PCR技术检测乳腺癌骨髓微转移：RT-PCR在检测肿瘤隐匿性微小转移灶方面，无论是敏感性还是特异性均优于以往的方法。与免疫组织化学染色相比，敏感性可增加10～100倍。Datta等［11］运用RT-PCR检测外周血和骨髓中细胞角蛋白19（CK19）的mRNA，结果6例淋巴结阴性的Ⅳ期乳腺癌病人中5例发现骨髓微转移。Schoenfeld等［12］将MCF-7细胞与正常骨髓细胞按不同浓度混合，结果免疫组织化学能检测出1/105的MCF-7细胞，而RT-PCR方法能测出1/106的MCF-7细胞，其检测敏感性比免疫组织化学提高10倍。当然，RT-PCR检测最好能与免疫组织化学相结合，这样可以给肿瘤细胞以正确的定位，排除上皮细胞污染所导致的假阳性。骨髓微转移与乳腺癌的预后、复发、转移有明显相关性。确定具有早期复发、转移危险的高危人群，在其发展为临床转移之前，给予积极辅助治疗，可以降低乳腺癌病人的复发、转移率。此外，骨髓微转移检测还可作为判定治疗疗效的指标和预测复发、转移的依据。

　　五、乳腺癌治疗的新方法——抗HER2/neu单克隆抗体

　　除传统治疗方式外，目前国际上最新的治疗方式是针对HER2/neu基因（即c-erbB2基因）位点的生物治疗。20％～30％乳腺癌病人有HER2/neu基因的过度表达，此类肿瘤更具浸润性，对化疗较不敏感且容易转移［12］。美国已推出经FDA批准的新药Herceptin，这是第一个已在临床应用的人抗HER2/neu单克隆抗体［13］。临床研究显示它能有效抑制体内HER2/neu高表达乳腺癌细胞纳??飨匝映?ER2/neu阳性乳腺癌病人的生存期。每周注射抗细胞外HER2/neu蛋白的单克隆抗体，对于13％HER2/neu过度表达的乳腺癌有效。若同时给予HER2/neu抗体和顺铂治疗，总有效率提高至25％，且部分疗效将保持一年以上。Burris总结了Herceptin与Docetaxel联合应用的效果，总有效率可达85.7%。HER2/neu单克隆抗体新治疗方式的出现既给乳腺癌病人带来了希望，同时也对病理医师提出了严峻的要求。该项治疗费用昂贵，病理医师应尽可能提供准确的HER2/neu基因状态，以指导选用最佳的治疗方案。目前常用的HER2/neu基因检测方法有免疫组织化学、荧光原位杂交(FISH)和酶联免疫吸附测定(ELISA)［14］。FISH能直接和准确地判断HER2/neu基因是否存在扩增，但较为昂贵和繁琐。免疫组织化学因其简便、快速、经济，已成为最常规的检测方法，但其中有许多问题应该引起注意：首先免疫组化的判断标准不一，使HER2/neu基因蛋白表达的检测结果不一致，而且是否蛋白表达阳性就可进行Herceptin治疗，还是需达到一定的阳性程度后再进行，目前尚无一致的结论。其次石蜡包埋，甲醛固定可能会对免疫组织化学检测结果产生一定的影响，造成假阴性。第三，采用不同公司的HER2/neu抗体，检测结果也不完全相同。因此，要作出准确的HER2/neu基因状态判断，首先要对上述问题进行统一。Herceptin治疗具有一定的心脏毒性，而且就我国研究现状来看，要开展此项治疗在人力、物力和财力上消耗较大，有待进一步的研究。

参考文献

　1　Wong AY, Salisbury E, Bilous M. Recent developments in stereotactic breast biopsy methodologies: an update for the surgical pathologist. Adv Anat Pathol, 2000,7:26-35.

　2　Page DL, Dupont WD, Rogers LW, et al. Atypical hyperplastic lesions of the female breast. A long-term follow-up study. Cancer 1985,55:2698-2708.

　3　Neuhausen SL, Ostrander EA. Mutation testing of early-onset breast cancer genes BRCA1 and BRCA2. Genet Test, 1997,1:75-83.

　4　Yaremko ML, Recant WM, Westbrook CA. Loss of heterozygosity from the short arm of chromosome 8 is an early event in breast cancers. Genes Chromosomes Cancer, 1995, 13:186-191.

　5　Tang SC, Shaheta N, Chernenko G, et al. Expression of BAG-1 in invasive breast carcinomas.J Clin Oncol, 1999,17:1710-1719.

　6　Foekens JA, Peters HA, Look MP, et al. The urokinase system of plasminogen activation and prognosis in 2780 breast cancer patients