云南省4种伊蚊的乙型脑炎病毒分离物的研究

>其它12种伊蚊(伪白纹伊蚊 Ae. pseudalbopictus、圆斑伊蚊 Ae. annandalei、台湾伊蚊 Ae. formosensis、显著伊蚊 Ae. prominens、股点伊蚊模拟亚种 Ae. gardnerii imitator、白雪伊蚊 Ae. niveus、白盏伊蚊 Ae. alboscutellatus、环胫伊蚊 Ae. desmotes、侧白伊蚊 Ae. albolateralis、白带伊蚊米基尔亚种 Ae. albotaeniatus mikiranus、爱氏伊蚊 Ae. eldridgei和亚白纹伊蚊 Ae. subalbopictus)共10396只蚊虫的病毒分离均为阴性。
2.2 病毒鉴定

2.2.1 免疫荧光试验 分离到的7株病毒均与乙脑单克隆抗体或乙脑免疫血清出现特异性荧光反应(表2)。
2.2.2 细胞酶免疫试验 B88-81、B86-17、B88-21和L99株均与乙脑单克隆抗体或乙脑免疫血清产生特异性酶免疫反应(表2)。
2.2.3 血凝特性 在pH6.4条件下，7株病毒的鼠脑蔗糖丙酮抗原均能与鸽血球出现凝集，滴度为1∶160～1∶5120之间(表2)。
2.2.4 血凝抑制试验 所有分离株均能与乙脑病毒产生高滴度的抑制作用，抑制效价高达1∶320～1∶2560(表2)。
2.2.5 中和试验 B88-81、B24-5、B86-17、B88-21和L99株对乙脑病毒的中和指数达到123～1000(表2)。
试验证实，分离到的7株病毒均为乙脑病毒。

表2 分离自伊蚊的7株乙脑病毒的鉴定
Table 2 Identification of seven strains of Japanese encephalitis virus isolated from Aedes mosquitoes

毒株
Virus
strains C6/36细胞法
C6/36 cell method 乳鼠法
Sucking mouse method
细胞病变
CPE 免疫荧光
JE McAb
IFAT 细胞酶免疫
JE McAb
C-EIA 乳鼠发病死亡
Illness and death
of mice tested 血凝
HA 乙脑血抑
JE HI 对乙脑中和指数
Neu.index
to JE virus
B88-81 ? ? ? ＋ 320 640 794
D266 ? ? ND ＋ 1280 1280 ND
B24-5 ? ? ND ＋ 640 320 123
B86-17 ? ? ? ＋ 1280 640 1000
B88-21 ? ? ? ＋ 640 320 1000
D107 ? ? ND ＋ 160 640 ND
L99 ? ? ? + 5120 2560 354

ND： 未做(Not done)
2.3 4种伊蚊的分布特点

白纹伊蚊在本次调查的9县市均有分布，其活动生态环境主要在居民点附近竹林和山坡竹林，畜圈和人房内几乎不能捕到该蚊。白纹伊蚊在野外竹林区的构成比为30.46%(7429只/45种24387只)，属优势或较优势种。
剌扰伊蚊仅在景洪、勐腊、耿马和河口捕获，主要分布于野外竹林，在该生境的构成比为12.71%(1194只/17种9394只)；在畜圈也有分布，构成比为1.26%(428只/20种33929只)。
窄翅伊蚊在景洪、耿马、瑞丽和盈江的畜圈和野外竹林均有分布，畜圈的构成比为2.89%(696只/19种24060只)，野外竹林(耿马)的构成比为2.75%(76只/24种2760只)，其数量较少。
阿萨姆伊蚊仅在耿马和潞西的野外竹林捕到，构成比为2.21%(103只/24种4656只)，该蚊分布较为局限，且数量较少。

3 讨论

白纹伊蚊在云南分布广泛，尤其在本省西南部热带和邻近热带的地区，是居民点附近竹林和山坡竹林区的主要蚊种之一。本次9个县市调查，该蚊为野外竹林区的优势或较优势蚊种。白纹伊蚊分布与人居有一定关系，凡该蚊多的生境，均为靠近村寨的竹林、树林。该蚊嗜血习性较广，并有多次吸血的特性。国外研究表明，白纹伊蚊能感染、传播和经卵传递乙脑病毒［2～5］。本次从云南自然界白纹伊蚊中分离到乙脑病毒，并证明云南该蚊对乙脑病毒有较高的易感性，还能叮咬传播和经卵传递乙脑病毒［6，7］。白纹伊蚊在乙脑流行中可与库蚊协同作用，是乙脑病毒重要媒介之一，在自然界乙脑病毒保存和传播中起重要作用。
以往未见从剌扰伊蚊、窄翅伊蚊和阿萨姆伊蚊中分离到乙脑病毒的报道。这次从这3种伊蚊中分得乙脑病毒，表明它们可参与乙脑病毒的传播。尤其是剌扰伊蚊和窄翅伊蚊，不仅分布于农村畜圈，在野外竹林也有分布，与人畜关系较为密切，具有重要的流行病学意义。
鉴于云南乙脑疫区分布较广，加之自然地理条件较特殊，蚊虫种类多，我们认为乙脑媒介亦较为复杂，有必要进行深入的研究。

* 云南省卫生厅科研基金资助课题
作者单位：云南省流行病防治研究所，云南大理 671000

参考文献

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[6] 张海林，米竹青，张云智. 云南白纹伊蚊感染、传播登革热和乙型脑炎病毒的研究. 中国媒介生物学及控制杂志，1997，8(1)：50～53
[7] 张海林，米竹青，张云智. 白纹伊蚊垂直传播乙型脑炎病毒的研究. 病毒学报，1996，12(1)：42～47

原作者： 张海林 施华芳 米竹青 自登云 龚正达

《云南省4种伊蚊的乙型脑炎病毒分离物的研究(第2页)》